顯色劑大全
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圣賓儀器科技上海有限公司
一、通用試劑
1、碘試劑檢查一槃有機(jī)化合物
1)碘蒸氣預(yù)先將盛有碘結(jié)晶的小杯置于密閉的玻璃容器內(nèi),使容器空間被碘蒸氣飽和,將薄層置于容器內(nèi)數(shù)分賾即顯棕色斑點(diǎn)。有時(shí),于容器中加放一小杯水,增加容器內(nèi)的濕度,可提高顯色的靈敏度。
(2)0.5%碘的氯仿溶液噴灑試劑,置空氣中待過量的碘揮發(fā)后,噴1%淀粉溶液,斑點(diǎn)由棕色轉(zhuǎn)為藍(lán)色。
2、硫酸試劑
檢查一槃有機(jī)化合物。
5%硫酸乙醇溶液作為色譜顯色劑用。噴灑后,置空氣中干燥15min,吹風(fēng)機(jī)烘烤100℃烤至斑點(diǎn)呈色(不同化合物呈不同顏色)。
3、(高錳酸鉀)重鉻酸鉀—硫酸試劑
檢查一槃有機(jī)化合物。
5g重鉻酸鉀溶于l00ml40%硫酸中。噴笣髟劑后,150〗縈熱至斑點(diǎn)出現(xiàn)(不同化合物呈不同顏色)。
7、中性高錳酸鉀試劑
檢查易還原性成分。
0.05%高錳酸鉀溶液。噴灑后粉紅色背景上顯黃色斑點(diǎn)。
8、堿性高錳酸鉀試劑
檢查還原性成分。
溶液I:1%高錳酸鉀溶液。溶液Ⅱ:5%碳酸鈉溶液。溶液I和Ⅱ等量混合使用,噴灑后,粉紅背景上顯黃色斑點(diǎn)。
10、熒光素—溴試劑
檢查不飽和化合物。
溶液I:0.1g熒光素溶于l00ml乙醇中。溶液Ⅱ:5g溴溶于l00ml四氯化碳中。先噴灑溶液I,然后將薄層板放入盛有溶液Ⅱ的缸內(nèi),黃色斑點(diǎn)出現(xiàn)后,于紫外光燈下檢視,紅色底板上顯黃色熒光斑點(diǎn)。
11.熒光顯色試劑
檢查一槃有機(jī)化合物。
(1)0.2%2,7--'氯熒光素乙醇溶液。
(2)0.01%熒光素乙醇溶液。
(3)0.1%桑色素乙醇溶液。
(4)0.05%羅丹明B乙醇溶液。
噴灑任一溶液,不同的化合物在熒光背景上可顯黑色或其它熒光斑點(diǎn)。
二、苷類鑒定試劑
1、糖鑒定試劑
(1)-萘酚-硫酸試劑
檢查還原糖。
①溶液I:10%—萘酚乙醇溶液。溶液Ⅱ:硫酸。取lml樣品的稀乙醇溶液或水溶液,加入溶液I2~3滴,混勻,沿試管壁緩緩加入少量溶液Ⅱ,二液面交界處產(chǎn)生紫紅色環(huán)為陽性反應(yīng)。
②15%—萘酚乙醇溶液21m1、硫酸13ml、乙醇87ml及水8ml混勻后使用。噴灑于薄層板上,100℃烤3~6min,多數(shù)糖顯藍(lán)色,鼠李糖顯橙色,所顯顏色于室溫可穩(wěn)定2天~3天。
(2)斐林試劑
檢查還原糖?!?br>
溶液I:6.93g結(jié)晶硫酸銅溶于l00ml水中。溶液Ⅱ:34.6g酒石酸鉀鈉、10g氫氧化鈉溶于l00ml水中。取lml樣品熱水提取液,加入4~5滴訚鞅配制的溶液Ⅰ、Ⅱ等量混合液,在沸水浴中加熱數(shù)分賾,產(chǎn)生磚紅色沉淀為陽性反應(yīng)。如檢查多糖和甙,取lml樣品水提液,加入lmll0%鹽酸溶液,在沸水浴上加熱l0min,過濾,再用10%氫氧化鈉溶液調(diào)至中性,按上述方法檢查還原糖。
(3)氨性硝酸銀試劑
檢查還原糖。
硝酸銀1g,加水20ml溶解,小心滴加適量氨水,邊加邊攪拌,至開始產(chǎn)生的沉淀將近全部溶解為止,過濾。取lml樣品的水溶液,加入lml試劑,混勻后,40℃微熱數(shù)分賾,管壁析出銀鏡或產(chǎn)生黑色沉淀為陽性反應(yīng)。本試劑也可作為色譜顯色劑,噴灑后于110〗縈熱數(shù)分賾,顯棕黑色斑點(diǎn)為陽性反應(yīng)。還原性物質(zhì)如醛類、鄰二酚類等有干擾。
(4)茴香醛-硫酸試劑
檢查糖類化合物。
硫酸lml加到含茴香醛0.5ml的乙酸溶液50ml中,需臨用前配制。噴灑于薄層板上,105〗縈熱至顯示色斑,不同糖顯不同顏色。
(5)苯胺-鄰苯二甲酸試劑
檢查糖類化合物。
苯胺0.93g和鄰苯二甲酸1.66g溶于100ml水飽和的正丁醇中。作色譜顯色劑用。噴后105℃烤5min,顯紅棕色斑點(diǎn)。
(6)l3-二'羥基萘酚-磷酸試劑
檢查酮糖、醛糖。
0.2%1,3--'二羥基萘酚乙醇溶液50ml于85%磷酸50ml混合均勻后使用。噴后105℃烤5min~10min,酮糖呈紅色,醛糖顯淡藍(lán)色。
(7)苯胺-二苯胺-磷酸試劑
檢查糖類化合物。
苯胺4ml、二苯胺4g及85%磷酸20ml溶于丙酮200ml中。噴灑于薄層板上,85〗縈熱10min,不同糖顯不同顏色。
(8)2,3,5-三苯基氯化四氮唑(T.T.C)試劑
檢查還原糖。
溶液Ⅰ:4%T.T.C甲醇溶液。溶液Ⅱ:4%氫氧化鈉溶液。臨訚鞅將溶液Ⅰ和Ⅱ等體積混合。噴灑后,100〗縈熱5~10min,顯紅色斑點(diǎn)為陽性反應(yīng)(醛類無干擾)。
(9)三氯化鐵-冰醋酸(K.K)試劑
檢查-去氧糖,常用于強(qiáng)心甙。
溶液I:1%三氯化鐵溶液0.5ml,加冰醋酸至l00ml。溶液Ⅱ:硫酸。取樣品乙醇提取液lml,譂髟管中,水浴上蒸去乙醇,殘?jiān)?.5ml溶液I溶解,沿試管壁緩緩加入溶液Ⅱlml,靜置分層,上層漸顯藍(lán)色,下層顯紅色或棕色為陽性反應(yīng)(其顏色隨苷元羥基和雙鍵的位置和個(gè)數(shù)不同而不同)。
(10)占噸氫醇試劑
檢查-去氧糖(常用于強(qiáng)心甙)。
10mg占噸氫醇溶于100ml冰醋酸中,再加入lml硫酸混合。取lml樣品,加入試劑lml,置水浴上加熱30min,顯紅色為陽性反應(yīng)。
(11)Gregg-Gisvold試劑
檢查2.6-去氧糖。
溶液I:10%三氯化鐵溶液。溶液Ⅱ:1%鹽酸甲醇溶液(97.2ml甲醇中含2.8ml鹽酸)。0.5ml溶液I于100ml溶液Ⅱ混合。將樣品的乙醇溶液點(diǎn)于濾紙片上,晾干后,噴灑上述混合試劑,110〗縈熱5min,顯藍(lán)色為陽性反應(yīng)。
(12)3,5-二氨基苯甲酸-磷酸試劑
檢查2-去氧糖。
3,5-二氨基苯甲酸二鹽酸鹽1g溶于80%磷酸25m
加水稀釋至60ml。噴灑后,100〗縈熱15min,2-去氧糖在日光下顯棕色,在紫外光下顯黃綠色熒光。
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